T-SPOT.TB 是γ干扰素释放试验（interferon gamma release assay，IGRA）的一种，具体采用的检测方法是一种简化的酶联免疫斑点（enzyme-linked immunospot ，ELISPOT），用于体外检测外周血中经过结核分支杆菌特异性抗原激活的效应T细胞。因此，T代表效应T细胞，SPOT 即斑点，TB代表结核。
T-SPOT.TB检测的原理
人体对结核分枝杆菌的免疫反应主要通过T细胞活化介导。对结核分枝杆菌致敏的T细胞，再次接受结核相关抗原刺激后，活化的效应T细胞（包括CD4+和CD8+T细胞）能够产生γ干扰素，通过ELISPOT技术检测产生γ干扰素的单个T细胞。ELISPOT检测是高灵敏度的，在细胞分泌的细胞因子扩散稀释前，其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子，灵敏度超过传统的ELISA实验。
T-SPOT.TB 标本要求
1、采集外周全血，无需空腹，一次性含肝素或肝素钠抗凝剂的真空采血管2管；
2、采血要求：2岁以下儿童2ml，2-9岁儿童4-6ml；成年人或10岁以上儿童8ml；
3、样本室温（15-25℃）保存与运输，不得冷冻或冷藏；
4、标本采集后4h内送到试验室，以便尽快完成检测；
5、一周内有输血史或做过PET-CT的患者会影响血液中淋巴细胞的分离，建议2周后进行检。
T-SPOT.TB 性能特点
1、特异性好——只针对结核分枝杆菌复合群敏感，与绝大多数环境分枝杆菌和卡介苗（BCG）无交叉反应。
2、灵敏度高——基本不受免疫力低下/受抑制影响，在肺外结核患者中有很高的检出率。
结果解释
阴性结果
提示患者体内不存在针对结核杆菌特异的效应T细胞。
假阴性结果：①感染阶段不同（如样本是在细胞免疫发生前获取的）；
②少数免疫系统功能不全/基础疾病，如HIV患者、肿瘤患者、儿童等；
③样本不正常保存与运输，试验非正常操作。
阳性结果
提示患者体内存在针对结核杆菌特异的效应T细胞，患者存在结核感染，但是否是活动性结核病，需结合临床症状和其它检测指标综合判断。T-SPOT.TB 不能作为单独的或决定性的诊断结核病的依据。
假阳性结果：4种环境分枝杆菌感染时：M.kansasii（堪萨斯）、M.szulgai（苏氏）、M.marinum（海）、M.gordonae（戈登）。
T-SPOT.TB 方法学优点
1、特异性好，不受卡介苗（BCG）接种与环境分枝杆菌影响；
2、灵敏度高，几乎不受个体免疫功能低下影响；
3、快速，次日下午14:00报告结果；
4、对肺外结核的诊断尤其有帮助；
